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細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告

時間:2024-04-28 08:50:07 文圣 報告 我要投稿
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細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告(精選5篇)

  在現(xiàn)在社會,越來越多人會去使用報告,報告具有成文事后性的特點(diǎn)。你還在對寫報告感到一籌莫展嗎?以下是小編為大家收集的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告,歡迎閱讀與收藏。

細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告(精選5篇)

  細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 1

  實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1、學(xué)習(xí)并掌握動物細(xì)胞培養(yǎng)的無菌操作技術(shù)。

  2、了解原代細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法及操作過程。

  3、學(xué)習(xí)細(xì)胞計數(shù)及營養(yǎng)液的配制。

  實(shí)驗(yàn)原理

  1、細(xì)胞原代培養(yǎng)

  原代細(xì)胞培養(yǎng)是指直接從動物體內(nèi)獲取的細(xì)胞、組織和器官,經(jīng)體外培養(yǎng)后,直到第一次傳代為止。這種培養(yǎng),首先用無菌操作的方法,從動物體內(nèi)取出所需的組織(或器官),經(jīng)消化,分解成單個游離細(xì)胞,在人工培養(yǎng)下,使其不斷的生長及繁殖。

  細(xì)胞培養(yǎng)是一種操作繁瑣而又要求十分嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)技術(shù)。要使細(xì)胞能在體外長期生長,必須滿足兩個基本要求:

  一是供給細(xì)胞存活所必須的條件,如適量的水、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長因子、氧氣、適宜的溫度,注意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調(diào)節(jié)。

  二是嚴(yán)格控制無菌條件。

  2、細(xì)胞死活鑒定死活細(xì)胞的鑒定方法有很多種,常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細(xì)胞死活鑒定方法,簡便,易于操作。不同的死活細(xì)胞鑒定方法有各自不同具體的反應(yīng)機(jī)理,但無論采用何種辦法,都是利用了死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異。

  染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法,根據(jù)染色機(jī)理的不同,染料或使死細(xì)胞著色,或使活細(xì)胞著色。

  死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括:

  1、死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異:活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜,對細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用,只允許物質(zhì)選擇性的.通過;而細(xì)胞死亡之后,細(xì)胞膜受損,通透性增加。常用的以臺盼藍(lán)鑒別細(xì)胞死活的方法就是利用了這一性質(zhì)。臺盼藍(lán),又稱錐藍(lán),是一種陰離子型染料,不能通過完整的細(xì)胞膜。所以經(jīng)臺盼藍(lán)染色后只能使死細(xì)胞著色,而活細(xì)胞不被著色。甲基藍(lán)有類似的染色機(jī)理。植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離也可鑒定死活。

  2、死活細(xì)胞在代謝上的差異:是采用美藍(lán)染料鑒定酵母細(xì)胞死活的依據(jù)。美藍(lán)是一種無毒染料,氧化型為藍(lán)色,還原型為無色。由于活細(xì)胞中新陳代謝的作用,使細(xì)胞內(nèi)具有較強(qiáng)的還原能力,能使美藍(lán)從藍(lán)色的氧化性變?yōu)闊o色的還原型,因此美藍(lán)染色后活的酵母細(xì)胞無色;而死細(xì)胞或代謝緩慢的老細(xì)胞,則因它們的無還原能力或還原能力極弱,使美藍(lán)處于氧化態(tài),從而被染成藍(lán)色或淡藍(lán)色。

  除此之外,還有一些細(xì)胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料,可以使活細(xì)胞液泡著紅色,而細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被著色;死細(xì)胞的液泡不被著色或淺染,染料彌散于整個細(xì)胞中,細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結(jié)合使用,如甲基藍(lán)-中性紅混合染色法。

  實(shí)驗(yàn)用品

  1、材料小白鼠

  2、試劑

  臺盼藍(lán)、伊紅、PBS緩沖液、細(xì)胞培養(yǎng)液(含生長因子)

  3、器材

  剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺、正置光學(xué)顯微鏡、倒置光學(xué)顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機(jī)、注射器、Eppendorf管、培養(yǎng)皿、酒精燈、塑料培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、血細(xì)胞計數(shù)板

  實(shí)驗(yàn)步驟

  1、取材

  取小鼠一只,采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min,取出轉(zhuǎn)入超凈工作臺內(nèi)的解剖盤中,無菌操作打開腹腔,取出其脾臟,除去其周圍的脂肪組織,并用PBS液自上而下淋洗1-2次,轉(zhuǎn)入無菌培養(yǎng)皿中待用。

  2、分離脾細(xì)胞

  用滴管向培養(yǎng)皿中注入30滴PBS緩沖液,再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟,注射時沿長軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼,并用“L”型針頭輕輕刮出脾細(xì)胞。在均勻吹勻脾臟細(xì)胞。

  吸取上述分離的單個脾細(xì)胞懸液,放入Eppendorf管中,使量至1mL,以1000r/min離心5min。

  3、培養(yǎng)脾細(xì)胞

  取塑料培養(yǎng)皿一套,用移液槍吸取培養(yǎng)液2mL加入塑料皿中,并將皿標(biāo)記待用。取離心后的Eppendorf管,棄去上清液,用移液槍(200ul)吸取塑料皿中的培養(yǎng)液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中,用槍頭吹勻管底的脾細(xì)胞,吸取200ul脾細(xì)胞懸液接種于上述塑料皿中,混勻后放入37°C,5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

  4、配制染液

  用生理鹽水配成5%臺盼藍(lán)染液,備用。

  5、染色

  取0.5mL細(xì)胞懸濁液放入試管中,加入1-2滴染液;旌。2-5min后將細(xì)胞放在血細(xì)胞計數(shù)板上觀察死活情況,注意不要有氣泡產(chǎn)生,放大倍數(shù)為10x10。染色后活細(xì)胞不著色,死細(xì)胞顯示藍(lán)色。注意染色時間不能超過15min,否則染液將細(xì)胞毒殺。

  6、計數(shù)

  在10x10倍的顯微鏡下觀察,計算血細(xì)胞計數(shù)板的4個4小方格的細(xì)胞數(shù)量。包括細(xì)胞總數(shù)與死細(xì)胞數(shù)量。壓線者計上不計下,計左不計右。

  7、計算細(xì)胞活力

  根據(jù)公式:細(xì)胞活力=(總細(xì)胞數(shù)-死細(xì)胞數(shù))/總細(xì)胞數(shù)×100%

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果

  臺盼藍(lán)染色后的細(xì)胞(10x10)伊紅染色后的細(xì)胞(10x10)

  總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞數(shù)統(tǒng)計表(10×10)

  項(xiàng)目自己培養(yǎng)細(xì)胞老師培養(yǎng)細(xì)胞總細(xì)胞數(shù)個/ml活細(xì)胞數(shù)個/ml細(xì)胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%

  分析與討論

  1、結(jié)果分析

  本次實(shí)驗(yàn)中我們小組自己培養(yǎng)細(xì)胞所測細(xì)胞活力為21.4%,并不算高,分析得應(yīng)有以下原因可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果(包括誤差):

 、湃粼跓o菌操作的過程中操作不規(guī)范,導(dǎo)致染菌,會極大的影響觀察,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。

 、迫粼陔x心分離呈單細(xì)胞的過程中離心機(jī)轉(zhuǎn)速過快或時間過長很可能會導(dǎo)致細(xì)胞破裂,導(dǎo)致小鼠脾細(xì)胞大量死亡。

 、侨旧珪r間過長,或觀察時間過長都會導(dǎo)致染色試劑將細(xì)胞殺死,使細(xì)胞活力驟降,這是導(dǎo)致細(xì)胞活力比較低的重要原因。

 、葘(shí)驗(yàn)中的一些操作不正確或不規(guī)范的情況、計算帶來的誤差等也會直接導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)誤差。

  2、注意事項(xiàng)

 、艊(yán)格進(jìn)行動物消毒,需用75%酒精消毒。

 、茋(yán)格進(jìn)行無菌操作,防止細(xì)菌、霉菌、支原體污染,避免化學(xué)物質(zhì)污染。

 、俏∫后w前,瓶口和吸管硬行火焰消毒;吸取液體時,避免碰撞。

  ⑷離心管入臺前,管口、管壁應(yīng)消毒。

 、蓪(shí)驗(yàn)者離開超凈臺時,要隨時用肘部關(guān)閉工作窗。

  ⑹器材使用時既要注意用火焰消毒,又要防止?fàn)C傷、燙死細(xì)胞。

  細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 2

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

  1、掌握顯示細(xì)胞中過氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。

  2、了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義

  3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測方法

  二、實(shí)驗(yàn)原理:

  1、細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的,無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。

  2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。

  3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。

  三、實(shí)驗(yàn)步驟:

  細(xì)胞中過氧化物酶的顯示

  1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;

  2、取骨髓細(xì)胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開股骨一端,用牙簽尖的'一端插入剪開的小孔中,摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上;

  3、涂片:用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個方向涂布推開,室溫晾干;

  4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿涂片為宜,處理30秒-1分鐘。

  5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘(以蓋滿涂片為宜)

  6、清水沖洗,番紅復(fù)染2min。

  7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)

  細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測與觀察吉姆薩染色:

  1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)

  2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞

  3、95%乙醇固定5min

  4、PBS緩沖液洗2次

  5、吉姆薩染色液染色5min

  6、蒸餾水輕輕洗去染液

  7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。

  吖啶橙染色:

  1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)

  2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞

  3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min

  4、PBS緩沖液洗2次每次1min

  5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

  6、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。

  四、結(jié)果與分析:

  根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個視野的統(tǒng)計,該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506×100=44.9

  Hela細(xì)胞凋亡過程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)

  五、思考題:

  1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制

  細(xì)胞凋亡是一個受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動自殺過程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對細(xì)胞凋亡的調(diào)控。

  2、細(xì)胞凋亡的特征

  凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。

  3、研究細(xì)胞凋亡的方法

  定性的研究方法:常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)

  定量或半定量的研究方法:各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

  細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 3

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1、觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期。

  2、初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。

  3、初步掌握繪制生物圖的方法。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  在植物體中,有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區(qū)細(xì)胞,高等植物細(xì)胞有絲分裂的過程,分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期?梢杂酶弑讹@微鏡觀察植物細(xì)胞的有絲分裂的過程,根據(jù)各個時期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的變化情況,識別該細(xì)胞處于有絲分裂的.哪個時期,細(xì)胞核內(nèi)的染色體容易被堿性染料著色。

  三、材料用具

  洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養(yǎng)皿、鉛筆、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸、體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01g/ml的龍膽紫(或紫藥水)

  四、實(shí)驗(yàn)過程

  1、洋蔥根尖的培養(yǎng)(提前3—4天)

  2、解離:5min

  3、漂洗:10min

  4、染色:5min

  5、制片

  6、鏡檢

  五、注意

  1、解離充分是實(shí)驗(yàn)成功的必備條件。解離充分,組織才能分散,細(xì)胞也不會重疊。

  2、漂洗時間一定要足夠,否則細(xì)胞染不上色。

  3、染色時,染液的濃度和染色時間必須掌握好。特別是染色不能過深,否則鏡下一片紫色,無法觀察。

  六、討論

  1、制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?談?wù)勀阕约旱捏w會。

  2、在觀察清楚有絲分裂各個時期的細(xì)胞以后,繪出洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂的簡圖,并標(biāo)明時期。

  細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 4

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

  2、觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動,改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。

  活細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的.流動,可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動做為標(biāo)志。

  三、材料用具

  蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆

  四、實(shí)驗(yàn)過程

  1.制作蘚類葉片的臨時裝片

  2.用顯微鏡觀察葉綠體

  3.制作黑藻葉片臨時裝片

  4.用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動

  五、討論

  1.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動,為什么?

  2.葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?

  3.植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動狀態(tài),這對于活細(xì)胞完成生命活動有什么意義?

  4.用鉛筆畫一個葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動方向。

  細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 5

  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

  1. 初步學(xué)會觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。

  2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細(xì)胞液中的水分就通過原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時,原生質(zhì)層就會與細(xì)胞壁逐漸分離開,也就是分升了質(zhì)壁分離當(dāng)細(xì)胞液的'濃度大于外界溶液的濃度時,外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液中,整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復(fù)成原來的狀態(tài),使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。

  三、材料用具

  紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液

  四、實(shí)驗(yàn)過程

  物理實(shí)驗(yàn)報告 ——化學(xué)實(shí)驗(yàn)報告 ——生物實(shí)驗(yàn)報告 ——實(shí)驗(yàn)報告格式 ——實(shí)驗(yàn)報告模板

  五、討論

  1.如果將洋蔥表皮細(xì)胞浸潤在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象?

  2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時,紅細(xì)胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?

  3.畫一個細(xì)胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過0.3g/ml蔗糖溶液處理,再經(jīng)過清水處理的細(xì)胞變化的一系列模式圖。

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