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什么是脾氣虛
現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)的“脾”不僅僅是一個簡單的解剖學(xué)概念,而且是人體最大的淋巴網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)[9]。脾氣虛與免疫低下存在一定的關(guān)系。本研究發(fā)現(xiàn),氣虛發(fā)熱組脾臟的質(zhì)量平均值均比正常組輕,形態(tài)體積縮小,質(zhì)地變硬,說明氣虛發(fā)熱組的免疫能力較正常組低,與諸多文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果相符合。對脾臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn),氣虛發(fā)熱組家兔脾臟局部組織有灶狀多核巨細(xì)胞浸潤,并見肉芽腫性病變,而正常組組織結(jié)構(gòu)正常。
氣虛證除有脾胃氣虛的一面,還有致熱的因素,氣虛發(fā)熱乃是氣虛、感邪二者綜合的病理反映[3]?偟膩碚f,氣虛發(fā)熱是脾臟、肺臟的病理結(jié)果,皮膚是氣虛發(fā)熱的外在表現(xiàn)。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),脾虛證患者在胃腸道形態(tài)學(xué)、胃組織細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器密度數(shù)量、細(xì)胞內(nèi)能量代謝、胃腸道黏膜保護(hù)性屏障作用、消化系統(tǒng)功能、胃腸道激素水平、免疫功能及植物神經(jīng)功能等方面均存在不同程度的異常[4]。從皮膚組織形態(tài)觀察目前主要是觀察表皮、 彈力纖維和膠原纖維[5-7]。本實(shí)驗(yàn)從組織形態(tài)學(xué)方面進(jìn)行研究,探討氣虛發(fā)熱對皮膚、肺臟、脾臟的影響,結(jié)果更直觀,對臨床用藥具有一定的指導(dǎo)意義。
1材料與方法
1.1動物
新西蘭兔4只,普通級,體質(zhì)量1.8~2.2 kg,許可證號:SCXK(粵)2008-0020,購于廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。
1.2試劑
脂多糖[lipopolysaccharides(LPS) 055∶B5,L2880,Sigma公司];無水乙醇(AR,天津市百世化工有限公司,批號:20081108);95%(φ)乙醇 (AR,天津市大茂化學(xué)試劑廠,批號:20080407);二甲苯(AR,天津市富宇精細(xì)化工有限公司,批號:20081106);甲醛溶液(天津市科盟化工工貿(mào)有限公司,批號:20080423);切片石蠟(中國上海標(biāo)本模型廠,批號:20070912)。
1.3HE染色染色劑的制備[8]
1.3.1Mayer蘇木精染液配制方法蘇木素1 g,鋁明礬1 g,檸檬酸1 g,水合氯醛50 g,碘酸鈉200 mg,蒸餾水1 000 mL。先將蘇木素加入煮沸的蒸餾水內(nèi)攪拌充分溶解后再依次加入鋁明礬和碘酸鈉至鋁明礬全部溶解,然后再加水合氯醛、檸檬酸加熱煮沸5 min,冷卻后過濾,隔日即可使用。
1.3.21%伊紅的配置方法取1 g伊紅,溶于99 mL蒸餾水中,即成1%(ρ)伊紅水溶液。
1.4儀器
EG 1160石蠟包埋機(jī)、RM 2255石蠟切片機(jī)、TEC-2500石蠟切片漂烘儀(均為德國LEICA產(chǎn)品);LKB 2188型超薄切片機(jī)(NOVA);倒置光學(xué)顯微鏡 (日本Olympus)。
1.5方法
1.5.1家兔氣虛發(fā)熱證模型的制備篩選體溫在38.5~39.5℃的正常家兔,隨機(jī)分為正常組與氣虛發(fā)熱組,每組各2只。氣虛發(fā)熱組家兔禁食1周,但不禁水,氣虛模型建立成功后,腹腔注射LPS 80 μg/kg建立家兔氣虛發(fā)熱模型(結(jié)果另文報(bào)道);正常組常規(guī)飼養(yǎng)。然后每隔0.5 h測1次體溫,連續(xù)監(jiān)測8 h。實(shí)驗(yàn)過程中動態(tài)觀察家兔的活動情況和精神狀態(tài)。
1.5.2石蠟組織切片的制備根據(jù)立題切取相應(yīng)的器官并進(jìn)行組織切片、染色與觀察。
取材與固定→沖洗→脫水→透明→浸蠟→包埋→切片、展片、貼片和烤片→脫蠟→復(fù)水→染色→透明→封片→觀察與拍照。
2結(jié)果
2.1動物狀態(tài)
氣虛發(fā)熱組:在對氣虛發(fā)熱組家兔進(jìn)行禁食不禁水飼養(yǎng)后,氣虛發(fā)熱組家兔出現(xiàn)懶動、蜷臥、喜擠堆取暖,體質(zhì)量下降,爪甲色淡,毛發(fā)疏散,干枯無澤,腹部、頭部毛發(fā)呈塊狀脫落,活潑性差,易抓回籠,排便偶出現(xiàn)稀便現(xiàn)象。用體溫計(jì)測肛溫正常。注射LPS后2 h開始發(fā)熱,4 h后發(fā)熱更明顯,呼吸急促,眼結(jié)膜充血,耳廓潮紅,耳根部灼熱,食量減少;6 h后體溫繼續(xù)上升,出現(xiàn)氣喘,鼻煽,不食,精神萎頓,大部分家兔出現(xiàn)稀便現(xiàn)象。正常組:家兔活動良好,排便正常,毛發(fā)有光澤,長短一致,爪甲紅潤;體質(zhì)量稍增;用體溫計(jì)測肛溫正常。
2.2臟器檢查
2.2.1肺臟正常組肺臟呈粉紅色,肺胸膜平坦光滑有光澤,肺小葉間質(zhì)分明,觸摸柔軟,有彈性,無顆粒感,切面既不干燥亦不明顯濕潤,用手?jǐn)D壓,有少量淋巴液、血液滲出。氣虛發(fā)熱組氣管和各級支氣管黏膜假復(fù)層柱狀纖毛上皮均有不同程度損傷,支氣管腔內(nèi)有多少不等的分泌物,肺泡壁增厚,毛細(xì)血管充血,個別肺實(shí)質(zhì)內(nèi)有灶狀出血。
2.2.2脾臟正常組脾臟的切面、濾泡、小梁和紅髓清晰可見,濾泡只在45 ℃的視線下才能見到極細(xì)的顆粒;小梁呈灰白色,細(xì)條狀;紅髓組織略柔軟,用刀輕刮不脫落。氣虛發(fā)熱組脾臟質(zhì)量平均之后較正常組輕,包膜肥厚皺縮,脾小梁紋理粗大而明顯。
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