藍莓的栽培培養(yǎng)和繁殖論文
藍莓(Blueberry)又名越橘,屬于杜鵑花科越桔屬(Vaccinium),原產(chǎn)北美,多年生落葉或常綠果樹,分為高叢藍莓、矮叢藍莓、半高叢藍莓和兔眼藍莓.果實深藍色,甜酸適度,富含氨基酸,抗氧化能力列所有果品之首,堪稱“世界水果之王”,被國際糧農(nóng)組織列為五大健康食品之一[1].目前,國際市場上藍莓果實售價昂貴,處于供不應(yīng)求的狀態(tài)[3].全世界有20多個國家和地區(qū)開始藍莓產(chǎn)業(yè)化栽培.遼寧丹東地區(qū)起步較晚,于1997年開始引種試栽,當時引進藍莓品種約有50多個,主要來源美國、加拿大,現(xiàn)已篩選出適合本地區(qū)栽培的品種有5個.由于確定主栽品種之初數(shù)量有限,我們用組織培養(yǎng)技術(shù)加快繁殖,為主栽品種的推廣提供一條有效、快捷的途徑.
1試驗材料與方法
1.1材料來源選取4年生藍莓半木質(zhì)化嫩莖、已木質(zhì)化的老莖和冬季休眠枝水培芽作為試材,于2007年分3次采自遼寧省森林經(jīng)營研究所苗圃基地,組培試驗于2007年在本所組培中心實驗室進行.
1.2試驗方法
1.2.1試驗程序外植體處理→接種→增殖培養(yǎng)→生根培養(yǎng)→移栽.
1.2.2外植體處理切取3cm帶頂芽或腋芽的幼嫩莖段去葉片留葉柄→流水沖洗60min→75%酒精浸泡30s→0.1%升汞溶液消毒3~7min→無菌水沖洗4~5次→用濾紙吸去水分→將莖段切成1~2個腋芽的小段.
1.2.3培養(yǎng)基制作以MS為基本培養(yǎng)基,按激素6—BA、NAA、ZT含量的不同,誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基設(shè)4系列處理(培養(yǎng)基1~4號),生根培養(yǎng)基設(shè)2系列處理(培養(yǎng)基5~6號),培養(yǎng)基配方見表1.表1中培養(yǎng)基蔗糖含量:分化和繼代培養(yǎng)基為30g/L,生根培養(yǎng)基為25g/L.瓊脂8.5g/L,pH值5.6~5.8,在115MPa氣壓下滅菌20min.
1.2.4培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度22~25℃,每天光照16h,光強2000lx.
2結(jié)果與分析
2.1外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)接種在初代培養(yǎng)基上的外植體在接種4天后陸續(xù)出現(xiàn)污染,接種15天后污染基本結(jié)束;莖段基部膨大,葉腋處萌發(fā)出側(cè)芽,生長狀態(tài)隨培養(yǎng)基不同而不同.休眠枝的采集應(yīng)在當年12月底至次年休眠芽萌動前為宜;水培時應(yīng)將水溫控制在20℃左右,每隔2~3天換水,并對枝條下部進行清洗修剪.芽長到2~3cm時就可以接種.對于工廠化育苗來說,年繁殖數(shù)達到百萬株或者更多,就要求在各個季節(jié)和時間相互補充,才能不斷滿足生產(chǎn),在用室外嫩莖和老莖做外植體時,應(yīng)充分考慮污染因素,采取有效措施降低污染率.
2.2外植體增殖培養(yǎng)在培養(yǎng)基的選擇上,我們曾試過MS、LS、N6、WPM等7種培養(yǎng)基,結(jié)果發(fā)現(xiàn)還是1/3MS培養(yǎng)效果最好,為此,我們選定1/3MS為試驗的基本培養(yǎng)基.激素選擇上,我們最初使用6—芐基腺嘌呤(6—BA)和糠基腺嘌呤(激動素KT),但是所示的'幾個常用濃度對藍莓試管苗的增殖幾乎無效,接種的外植體,有的長時間不生長,有的只長出愈傷組織,有的長出小葉逐漸色壞死.后來我們選用了價格很昂貴的玉米素6—(4羥基—3—甲基—2—反式—丁烯基氨基)嘌呤,試驗使用濃度0.5~3.0mg/L.結(jié)果表明,玉米素濃度超過2.0mg/L,接種的外植體莖段萌芽迅速,但長勢不正常,顯示所用濃度偏高.因此玉米素濃度在1.0~2.0mg/L范圍內(nèi)都比較適合.外植體培養(yǎng)20d左右,在A3、A4系列培養(yǎng)基中均有腋芽萌動并逐漸伸長生長,待組培苗長到4~5cm時,采用微枝扦插和叢芽增殖相結(jié)合的增殖方式,將長芽分切成帶1~2個芽的莖段,基部叢芽剝成幾塊轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基中進行繼代培養(yǎng),使其繼續(xù)分化出芽.50d左右腋芽基部又能形成叢生芽.組培苗在A3系列培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)增殖分化的苗數(shù)量多且健壯,繁殖系數(shù)在8倍左右.綜上所述,用A3系列培養(yǎng)基中1/3MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+ZT1.5mg/L進行增殖培養(yǎng)較為理想,一般在2個周期(40~50d)增值系數(shù)即能達到8倍以上.
2.3生根培養(yǎng)在無菌狀態(tài)下,選擇健壯的小苗切割成高2cm左右的莖段,轉(zhuǎn)入不同生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng),結(jié)果表明在1/4MS中的小苗生根率均明顯優(yōu)于全量MS培養(yǎng)基,所用激素以IBA0.5mg/L效果最好,生根率達100%且每株可生5~10條根;所需天數(shù)最少,根條數(shù)最多,并且根系生長情況最好,所以1/4MS+IBA0.5mg/L培養(yǎng)基為最適生根培養(yǎng)基.同時,在溫室煉苗時,我們進行了瓶外生根試驗,從常用生根藥劑種選擇吲哚丁酸和萘乙酸,用不同濃度浸根,處理后20天結(jié)果表明,NAA對藍莓沒有明顯催根作用,而IBA5~10mg/L催根效果都很好,生根率高、發(fā)根多、根系長,20mg/L則基部膨大,發(fā)根短,表明濃度偏高.瓶外生根更適合于工廠化生產(chǎn),可以簡化程序和操作方法,顯著提高工作效率,省去培養(yǎng)基和相應(yīng)設(shè)備,降低成本,便于大量生產(chǎn).在移栽作業(yè)中,我們還發(fā)現(xiàn),可以將藍莓組培苗切段,2芽一段扦插于腐苔蘚中,控制好溫度與濕度,生根與成活率很好,極大的增加了繁殖系數(shù).
2.4組培苗移栽當苗根長到1~1.5cm時,打開瓶蓋,取出小苗,洗凈培養(yǎng)基,(幼枝上沾有培養(yǎng)基,常會引起幼枝發(fā)生腐爛,應(yīng)注意避免).用多菌靈500~800倍液浸泡30min左右,然后栽入0.1%高錳酸鉀消毒過的苗床上.苗床基質(zhì)分5個處理,分別為沙∶草炭土=1∶1、沙∶蛭石=1∶1、純沙、純蛭石、腐苔蘚.試驗結(jié)果表明,以腐苔蘚為基質(zhì)最好,成活率最高80%以上.草炭土和沙半量配置也不錯,成活率50%以上.苔蘚用500倍多菌靈溶液浸泡撈出后稍瀝干水分,鋪到事先準備好的苗床上,壓平壓實,苔蘚厚度5~7cm.苗木移栽后,每天澆水一次,每周噴一次甲基托布津和營養(yǎng)液,每半月澆灌一次0.5%的FeSO4溶液,蓋塑料拱棚,保溫保濕,冬季溫室內(nèi)維持15~25℃,夏秋在露地搭蔭棚遮擋直射陽光,棚溫不超過28℃,7天后逐漸增加通風(fēng)量,并逐漸減少澆水,1個月后移栽到營養(yǎng)缽或者直接移栽大田[文秘站-中國最強免費!].移栽前在畦內(nèi)撒少量草炭土,移栽后于生長季澆灌FeSO4溶液2~3次.移栽后當年生長量可達20~30cm,翌春可有部分植株開花結(jié)果.
3結(jié)論
3.1莖段、莖尖培養(yǎng)在A3系列培養(yǎng)基中的1/3MS+BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+ZT1.5mg/L上誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)40~50d,繁殖系數(shù)8倍以上;
3.2生根培養(yǎng)以A5系列培養(yǎng)基中的1/4MS+IBA0.5mg/L最好,生根率達100%且每株可生5~10條根;
3.3移栽基質(zhì)以腐苔蘚為最好,成活率達80%以上.4討論藍莓育苗可采用根蘗繁殖、根條繁殖、扦插繁殖[2—3],但所需的繁殖材料增多,繁殖系數(shù)比較低,而組織培養(yǎng)能夠迅速去除病毒和更新品種,加快繁殖速度,短時間內(nèi)能迅速增加苗木數(shù)量,可以形成規(guī);a(chǎn),因而有更大的優(yōu)勢,所以引種初期一般采用組培技術(shù)進行藍莓的生產(chǎn).對組織培養(yǎng)的藍莓苗應(yīng)用于生產(chǎn),人們通常會懷疑:品種優(yōu)良性狀是否有變化,結(jié)果是否延遲,產(chǎn)量是否降低,據(jù)觀察,由外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織出苗,容易發(fā)生染色體變異,而由定芽發(fā)育成的幼枝變異少,是可以保持品種原有特性,用于生產(chǎn)性栽培的.因此,我們在繁育過程中通過激素調(diào)整試驗,避免通過愈傷組織成苗.藍莓組培苗移栽后當年生長量可達20~30cm,翌春可有部分植株開花結(jié)果,品種不同有差異.盛果期在5年左右,其壽命為50年.丹東地區(qū)現(xiàn)有人工栽培藍莓面積10~15hm2,主栽品種有藍豐(高叢)、北陸(半高叢)、北藍(半高叢)、北村(半高叢)、美登(矮叢).其中前4個品種屬鮮果銷售優(yōu)良品種,美登適合做加工型品種.露地栽培的藍莓采果期在7月15日至8月15日,采收期可達1個月.溫室栽培的藍莓在5月20日結(jié)果.
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