神經(jīng)纖維髓鞘漏斗膜顯示法的研究論文
組織學(xué)技術(shù)是一門對人體或動物進(jìn)行微紐結(jié)構(gòu)觀察,將形態(tài)學(xué)理論具體化、真實化的科學(xué)。神經(jīng)纖維髓鞘漏斗膜一一施蘭(Sehmidt一Lonterman)氏切跡,在有的孩料里價紹是用切片法,其結(jié)果觀察樣品不大理想,即施蘭氏切跡一一漏斗膜看不出完整立體的漏斗形狀,就連有的圖譜中施蘭氏切跡,也觀察不出較理想的漏斗膜。近年來我們運用了“有髓神經(jīng)分離標(biāo)本神經(jīng)髓梢漏斗膜顯示法”.用此法所分離出標(biāo)本不僅顯示出了神經(jīng)纖維的髓鞘,而更主要的是顯示出了產(chǎn)罄的漏斗膜,并有立體感。現(xiàn)將方法介紹如下,供同道們參考。
方法
1、取材:取狗、貓的坐骨神經(jīng)。
2、固定:固定于下液內(nèi)24小時,即甲醛6毫升,毗吮10毫升,硝酸鈉0.5克,蒸餾水40毫升。
3、沖洗:流水沖洗24小時,除去甲醛和毗咤。
4、放入0.7%硝酸銀中36一48小時。
5、以下液還原6小時,對苯二酚1克、甲醛5毫升,無水亞硫酸鈉0.25克,蒸餾水80毫升。
6、水洗:蒸餾水洗,入存甘油保存。
7、用解剖分離針分離神經(jīng),放在載玻片上進(jìn)行封固。
8、封固。運用二重封片法(即先用一個蓋玻片去壓載玻片代有甘油的神經(jīng)纖維,而后在此蓋片上蓋一個大蓋玻片用樹膠封固。
結(jié)果
髓鞘呈淡黃色、漏斗膜褐色~黑色,并有明顯的立體感。
討論
1、選材很重要,貓比狗的`材料好,我們應(yīng)用狗的材料多次,都不如用貓的清晰可見。
2、運用鍍銀法,所以一切用器一定要用洗滌液浸泡后方能使用,否則,影響結(jié)果的顯示。
3、封固時一定先將小蓋片周圍多余的甘油擦去,然后再滴上樹膠封固,否則混濁不清。
4、經(jīng)多次反復(fù)實踐驗證,此法簡單,容易掌握。髓鞘、漏斗膜、郎鼎氏等均明顯可見。
主要參考文獻(xiàn)
(1)杜單民:實用組織學(xué)技術(shù),1981;179
(2)彩色組織學(xué)圖譜,南京醫(yī)學(xué)院組胚教研組、上海第二醫(yī)學(xué)院組胚教研室,人民衛(wèi)生出版社,1981
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